电化学发光
Luminescence（发光）是指物质在吸收能量后，通过放射出光的方式释放出来的过程，包括荧光和磷光。荧光是一种特殊的发光现象，是物质在短波长紫外光的激发下，吸收能量后，通过放射出长波长的荧光光子释放出来的过程。荧光和磷光的区别主要在于激发光的区别。荧光是在吸收短波长光，如UV紫外线，之后能量被获得，然后以长波长的光发射能量，发光颜色也可以不同于激发光，通常持续时间非常短，大约在纳秒量级。而磷光是物质被激发后，在放射出光之前暂时存储能量，在一段时间内诱发发光，通常发光时间比较长，可以达到几个小时或更长时间，而颜色则通常与激发光相同。总体而言，荧光是一种比较常见且常用的现象，具有广泛的应用，例如在荧光显微镜、荧光染料、荧光检测等领域中得到广泛应用，而磷光则是在应用领域相对较小，比如在矿石或核辐射检测等领域中应用比较多。
电化学发光免疫分析的原理
小艾今天给大家带来“艾”学习的主题是：IVD系列之化学发光免疫分析技术系列，希望能对大家有所帮助哦~
1.什么是化学发光免疫分析技术？ 化学发光免疫分析 ( Chemiluminescence immunoassay, CLIA) 包括两个部分，即高灵敏的化学发光检测和高特异性的免疫反应,其基本原理是免疫反应中的酶作用于发光底物，使之发生化学反应并释放出大量的能量，产生激发态的中间体。
这种激发态中间体回到稳定的基态时，可同时发射出光子。
利用发光信号测量仪器即可测量出光量子产额，该光量子产额与样品中的待测物质的量成正比，由此可以建立标准曲线并计算样品中待测物质的含量。
CLIA可用于检测各种抗原、半抗原、抗体、激素、酶、脂肪酸、 维生素和药物等，是继放射免疫分析、酶联免疫分析、荧光免疫分析和时间分辨荧光免疫分析之后发展起来的一项最新免疫测定技术。
2.化学发光免疫分析法有哪些类型？ 化学发光免疫分析 ( Chemiluminescence immunoassay, CLIA) 按照发光剂的不同分为三种类型：直接化学发光免疫分析、酶促化学发光免疫分析、电化学发光免疫分析。
其中直接化学发光免疫分析包括吖啶酯系统和草酸酯系统；酶促化学发光免疫分析包括辣根过氧化物酶-鲁米诺（HRP-Luminol）系统、碱性磷酸酶（AP-AMPPD）系统、黄嘌呤氧化酶系统；电化学发光免疫分析包括三联吡啶钌-三丙胺系统。
3.什么是直接化学发光分析法？ 直接化学发光分析法是指吖啶酯直接标记抗体（抗原），与待测标本中相应的抗原（抗体）发生免疫反应后，形成固相包被抗体-待测抗原-吖啶酯标记抗体复合物，这时只需加入氧化剂（H2O2）和NaOH使成碱性环境，吖啶酯在不需要酶的催化作用下直接分解、发光 ，然后由集光器和光电倍增管接收、记录单位时间内所产生的光子能，这部分光的积分与待测抗原的量成正比，可从标准曲线上计算出待测抗原的含量。
4.什么是酶促化学发光免疫分析法？ 化学发光酶免疫分析（Chemiluminescence enzyme immunoassay，CLEIA）是用参与催化某一化学发光反应的酶如辣根过氧化物酶（HRP）或碱性磷酸酶（ALP）来标记抗原或抗体，在与待测标本中相应的抗原（抗体）发生免疫反应后，形成固相包被抗体-待测抗原-酶标记抗体复合物，经洗涤后，加入底物（发光剂），酶催化和分解底物发光，由光量子阅读系统接收，光电倍增管将光信号转变为电信号并加以放大，再把它们传送至计算机数据处理系统，计算出测定物的浓度。
5.什么是辣根过氧化物酶化学发光免疫分析法？ 辣根过氧化物酶-鲁米诺免疫分析系统采用辣根过氧化物酶（HRP）标记抗体（或抗原），在与反应体系中的待测标本和固相载体发生免疫反应后，形成固相包被抗体-待测抗原-酶（HRP）标记抗体复合物，这时加入鲁米诺发光剂、H2O2和化学发光增强剂使产生化学发光。
6.为什么HRP可以作为酶报告系统被广泛使用？ HRP可以作为酶报告系统被广泛使用,主要是因为三个因素：首先，HRP能够放大微弱信号，增强对低丰度靶分子的检测能力。
其次，HRP (~44 kDa)相对于其他报告酶(如碱性磷酸酶(~140 kDa))的体积较小，进一步提高了细胞内对样品的渗透，减少了空间位阻，使免疫反应性损失最小化。
第三，HRP的高周转率和良好的稳定性，使其能够产生快速而强的信号。
7.什么是电化学发光免疫分析法？ 电化学发光免疫测定技术（electro－chemiluminescence immunoassay， ECLIA）电化学发光(ECL)和免疫测定相结合的产物；在电极表面由电化学引发的特异性化学发光反应，用电化学发光剂三联吡啶钌[Ru(bpy)3]2+标记抗体，通过抗原-抗体反应和磁珠分离技术，根据三联吡啶钌在电极上发出的光强度对待测的Ag或Ab进行定量/定性。
ECLIA是目前最先进的标记免疫测定技术之一，是继EIA、RIA、FIA、时间分辨荧光免疫技术（TRFIA）之后的新一代标记免疫测定技术。
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